Plasma rico em plaquetas e peptídeo inibidor de il-β atenuam o processo inflamatório de lesão muscular em ratos wistar

Abstract

As lesões musculares estão entre as mais frequentes na prática esportiva, sendo uma das principais causas de afastamento de atletas em suas modalidades. A resposta inflamatória e as espécies reativas de oxigênio produzidas no processo de reparação tecidual, caso não controladas em sua fase inicial, podem produzir um quadro crônico com perda da característica histológica normal. O plasma rico em plaquetas (PRP) obtido do sangue autólogo é considerado um recurso útil no processo de reparação tecidual por conter uma concentração de plasma com grande quantidade de plaquetas e fatores de crescimento quando comparado com o sangue total. A interleucina (IL) 1β é uma citocina pró-inflamatória e a inibição da sua atividade pode ser adequada para que haja um acelerado reparo da lesão. Bloqueadores da ação desta citocina já existem no mercado, mas seu alto custo limita o acesso e uso clínico. Em função disso, a presente pesquisa se propôs a utilizar um peptídeo inibidor baseado na molécula do receptor antagonista IL-1(IL-1RA) com capacidade de atenuar as respostas desencadeadas pela IL-1β, através do bloqueio do receptor funcional, na fase inflamatória da reparação tecidual. Persiste na literatura dúvidas em relação à concentração leucocitária no preparo do PRP e quais situações estariam indicadas. Assim, um dos objetivos deste trabalho é avaliar a ação do PRP rico em leucócitos (PRP-RL), do PRP pobre em leucócitos (PRP-PL), isolados ou associados a um peptídeo antagonista dos domínios 1 e 2 do receptor 1 de IL-1β (PAD1-2) e também o uso isolado deste no controle do processo inflamatório inicial pós-lesão muscular traumática induzida em animais. Primeiramente, sob anestesia, 6 ratos machos Wistar foram submetidos à punção cardíaca para retirada de 7 mL de sangue para obtenção do PRP-RL e PRP-PL. Após, foram utilizados mais 84 ratos machos Wistar divididos em sete grupos de doze animais: Sham; Lesão Muscular (LM); LM + PRP-RL; LM + PRP-PL; LM + PAD1-2; LM + PRP-RL+ PAD1-2; LM + PRP-PL + PAD1-2. Foi induzido sob anestesia, um trauma muscular contusional nos animais e no quinto dia feita eutanásia por decapitação em guilhotina e dissecação do gastrocnêmio. Parâmetros histológicos avaliaram infiltrados de células inflamatórias e por RT-qPCR foi avaliada a expressão gênica do fator de transcrição nuclear Kappa B (NF-kB) e IL-1β. Por ELISA foram avaliados os níveis proteicos de citocinas pró e anti-inflamatórias (fator de necrose tumoral alfa - TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-4, IL-10 e fator de transformação de crescimento beta - TGF-β) e avaliada por espectrofotômetro a produção de oxidantes, defesa antioxidante e danos oxidativos (NO, DCF, SOD, GSH, Carbonil e Sulfidrila). Em todos os parâmetros avaliados foram obtidos redução dos marcadores inflamatórios e oxidantes com manutenção do equilíbrio oxiredutor, de forma mais evidente nos grupos tratados com PRP-PL + PAD1-2 que permite afirmar que houve regulação do processo inflamatório inicial que auxilia na transição mais efetiva para a fase regenerativa do reparo tecidual.